2022 年 6 月，《國家級轉(zhuǎn)基因玉米品種審定標準（試行）》由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布。2023 年 12 月，37 個轉(zhuǎn)基因玉米品種通過審定，26 家企業(yè)獲轉(zhuǎn)基因玉米種子生產(chǎn)經(jīng)營許可證。2024 年 3 月，27 個轉(zhuǎn)基因玉米品種通過審定。

根據(jù)近兩年轉(zhuǎn)基因品種參試中出現(xiàn)的情況，以及相關(guān)轉(zhuǎn)基因業(yè)務(wù)的快速發(fā)展，存在許多問題且行業(yè)尚未形成共識和標準?；诖?，本文淺談對種子企業(yè)如何開展轉(zhuǎn)基因業(yè)務(wù)？

一、轉(zhuǎn)化體的選擇

目前，市面上已獲得安全證書的玉米轉(zhuǎn)化體很多，各轉(zhuǎn)化體的基因基本相同，如何選擇轉(zhuǎn)化體也是種子公司面對的嚴峻問題。主要是因為，對于這些轉(zhuǎn)化體，行業(yè)內(nèi)沒有一個真實有效的評價。各性狀公司也在積極主動地尋找合作伙伴，搶占市場份額，為后續(xù)轉(zhuǎn)基因雜交種廣泛推廣，獲取高額的專利費做鋪墊。

對于轉(zhuǎn)化體的評價，主要是通過對轉(zhuǎn)基因雜交種的田間表型鑒定和產(chǎn)量鑒定來評價。性狀公司很少去開展此類試驗，主要由種子公司去開展，但針對同一品種多個轉(zhuǎn)化體的試驗，又會耗費較大的人力物力和資金，此項業(yè)務(wù)較難開展。更何況，不同品種對轉(zhuǎn)化體還有一定的選擇性，就為轉(zhuǎn)化體的評價造成了更大的困難。

基于此，對于轉(zhuǎn)化體的選擇，更多是根據(jù)疊加基因的多少來判斷。個人以為，在基因基本一致的情況下，轉(zhuǎn)化體的優(yōu)劣，取決于于性狀公司開展遺傳轉(zhuǎn)化的群體大小，遺傳轉(zhuǎn)化背景材料的水平，以及對受體品種的影響程度。種子公司最好是選擇1-2家，轉(zhuǎn)化體較好且后續(xù)研發(fā)實力較強的性狀公司開展合作。

二、轉(zhuǎn)基因自交系的應(yīng)用與種子繁殖

種子公司委托性狀公司轉(zhuǎn)育，性狀公司往往會交付 5  個果穗左右，這些果穗符合SSR 位點差異 ＜2，背景恢復(fù)率 98% 以上，轉(zhuǎn)化體純度 100%，轉(zhuǎn)化體純合率100%，且不含其他轉(zhuǎn)化體，農(nóng)藝性狀基本無差異等指標。

種子公司接收到交付的果穗后，需要按照性狀公司的繼續(xù)指南，篩選出最優(yōu)版本，再進行擴繁，并開展一系列檢測，形成轉(zhuǎn)基因自交系原原種。這個過程，往往也需要 2 年的時間，具體的操作步驟如下：

1）對接收到的果穗，按照不同版本穗行種植，結(jié)合除草劑篩選、農(nóng)藝性狀調(diào)查等，與另一親本自交系組配出不同版本的轉(zhuǎn)基因雜交種。同時，對每一版本種子進行擴繁。

2）對已組配的轉(zhuǎn)基因雜交種，在適宜生態(tài)區(qū)開展多點鑒定，以原始非轉(zhuǎn)基因雜交種做為對照。根據(jù)田間考察和產(chǎn)量結(jié)果，結(jié)合轉(zhuǎn)基因?qū)彾藴剩Y選出最優(yōu)版本轉(zhuǎn)基因自交系，其他版本淘汰。

3）將最優(yōu)版本自交系不同世代的穗行，取混樣檢測，如果達到標準，即混合為原原種。同時，制備足量轉(zhuǎn)基因雜交種，開展轉(zhuǎn)基因雜交種與轉(zhuǎn)化體性狀一致性鑒定，達標后申請參加國家轉(zhuǎn)基因試驗。

然而，在轉(zhuǎn)基因自交系種子繁殖過程中，很容易由于花粉混雜導(dǎo)致繁殖種子出現(xiàn)問題，主要是由于轉(zhuǎn)化體在種子中，肉眼無法分辨。根據(jù)個人的經(jīng)驗，在獲得轉(zhuǎn)育完成的轉(zhuǎn)基因種子后，在后代套袋授粉中，要注意以下幾點：

1) 每一代轉(zhuǎn)基因種子繁殖，都需要噴施對應(yīng)倍數(shù)的指定除草劑進行篩選；

2) 需要在授粉前，采集葉片開展轉(zhuǎn)化體真實性、轉(zhuǎn)化體基因型（純合率）、非目標轉(zhuǎn)化體污染檢測、轉(zhuǎn)化體純度和背景純度等指標，保證繁殖的種子符合目標種子要求；

3) 在制備轉(zhuǎn)基因參試種子時，要確保轉(zhuǎn)基因種子符合標準的同時，還需要對另一親本自交系進行檢測，保證種子純度和SSR位點。這樣，制出的轉(zhuǎn)基因雜交種才會符合參試要求；

4) 針對轉(zhuǎn)基因親本種子和雜交種，建議嚴格按照一繁多用的原則，特別是需要參加試驗的雜交種，一次制備區(qū)試試驗和生產(chǎn)試驗的種子，并進行檢測達標后備用。

三、轉(zhuǎn)基因回交轉(zhuǎn)育

隨著轉(zhuǎn)基因產(chǎn)業(yè)化的推進，很多種子公司開始自己開展回交轉(zhuǎn)育工作?；亟皇浅Ｒ?guī)育種中常用的技術(shù)，但轉(zhuǎn)基因回交轉(zhuǎn)育還有其復(fù)雜性和專業(yè)性，具有一定的門檻。結(jié)合自己對轉(zhuǎn)基因回交轉(zhuǎn)育的理解，提出一些自己的想法如下：

1）轉(zhuǎn)基因供體的選擇

為了加快回交轉(zhuǎn)育進程，選擇最接近受體自交系的供體至關(guān)重要。但由于種子公司未掌握轉(zhuǎn)化體資源庫，很難篩選到最優(yōu)供體。建議通過對受體自交系進行SSR檢測，結(jié)合性狀公司資源，選擇供體，會事半功倍。

2）回交轉(zhuǎn)育過程中的注意事項

(1) 從BC1F1開始，到BCnF1，每一代都需要噴施除草劑篩選，并且通過背景回復(fù)率和農(nóng)藝性狀來選擇最接近受體自交系的植株，從而提升回交轉(zhuǎn)育的效率。一般回交到BC3-BC4，背景回復(fù)率就可能達到95%以上。如果不急于轉(zhuǎn)育，可以省去前幾次回交過程中的背景回復(fù)率檢測，增加回交代數(shù)，也會取得不錯的結(jié)果。

(2) 輪回親本最好是一次提供足夠量的，純度高的種子，最好是原原種，這樣每次回交的材料一致，有助于回交轉(zhuǎn)育的效率。

(3) 從 BC1F1 開始，結(jié)合業(yè)務(wù)量的大小，適當?shù)財U大群體，利于快速選擇到高回復(fù)率的植株。

(4) 在回交轉(zhuǎn)育過程中，邀請材料的選育人到田間考察指導(dǎo)，對篩選高回復(fù)率植株有重要意義。

(5) 從BCnF1到BCnF3，除了回交轉(zhuǎn)育過程中的檢測外，還需要開展SSR檢測，轉(zhuǎn)基因位點基因型鑒定，篩選出純合子，并在下一代除草劑篩查中，全部為陽性植株，授粉所得果穗即為最終達標的目標果穗。

(6) 回交轉(zhuǎn)育過程中，需要加強田間管理，嚴格把控授粉過程，確保不混雜，保證轉(zhuǎn)化體的真實性。

(7) 選擇專業(yè)負責(zé)的人員，嚴格按照回交轉(zhuǎn)育的流程操作，提升回交轉(zhuǎn)育的效率和質(zhì)量。

(8) 加強各個關(guān)鍵環(huán)節(jié)的管理，轉(zhuǎn)基因芯片在種子里，看不到摸不著，必須加強轉(zhuǎn)基因種子的管理，保證每一步無差錯。

當前，轉(zhuǎn)基因玉米品種參試渠道單一，容量有限，各種子公司都渴望盡快審定轉(zhuǎn)基因品種，搶占市場。根據(jù)轉(zhuǎn)基因品種的定點示范種植透漏的一些信息，一個品種并不會因為轉(zhuǎn)基因的加持，就可以迅速占領(lǐng)市場，受體品種的表現(xiàn)依然占據(jù)主導(dǎo)地位。

因此，在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)業(yè)化的風(fēng)口上，在關(guān)注各種轉(zhuǎn)化體的同時，種子公司還應(yīng)該抓住種質(zhì)資源的創(chuàng)新，培育更加高產(chǎn)廣適的底盤品種，鑄牢核心競爭力，打造自己的護城河，再疊加多種抗逆的優(yōu)勢轉(zhuǎn)化體。只有這樣，才能在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)業(yè)化的過程中，乘風(fēng)飛翔，占據(jù)不敗之地。